ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)應(yīng)了解的規(guī)則
ELISA試劑盒在廣大客戶的支持和全體員工的努力下,正在日益發(fā)展和壯大,所有試劑盒經(jīng)過(guò)充分驗(yàn)證,保證有效且重復(fù)性佳,感謝廣大科研工作者對(duì)我司的信任和支持,這是鼓勵(lì)也是鞭策,讓我司在生命科學(xué)這一領(lǐng)域越走越遠(yuǎn)。
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)應(yīng)了解的規(guī)則:
a)根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔,每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
b)將所有試劑盒充分混勻,不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
c)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干,重復(fù)此操作3次,如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
d)加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi),立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體,蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。
e)每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
f)取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
g)每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘,避免光照。
h)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干,重復(fù)此操作3次,如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
i)在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
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