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ELISA試劑盒實驗步驟解析：
A、加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔，空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣時將樣品加于酶標板底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，給酶標板覆膜，37℃孵育2小時，為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。
B、棄去液體，甩干，每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內配制)，酶標板加上覆膜，37℃溫育1小時。
C、棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約350μl /每孔，甩干并在吸水紙上輕拍將孔內液體拍干。
D、每孔加工作液(臨用前15分鐘內配制)100μl，加上覆膜，37℃溫育1小時。
E、棄去孔內液體，甩干洗板5次，方法同步驟C。
F、每孔加底物溶液100μl，酶標板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實際顯況酌情縮短或延長，但不可超過30分鐘，當標準孔出現(xiàn)明顯梯度時，即可終止)。
G、每孔加終止液50μl，終止反應，此時藍色立轉，終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。
H、立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)，應提前打開酶標儀電源，預熱儀器，設置好檢測程序。
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