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PCR基因在“Torsch”診斷中的應用

2009-07-30 [3488]

PCR基因擴增法在“Torsch”診斷中的應用

在妊娠早期(1-3個月),有些病原微生物的感染易導致胎兒畸形,這些病原體中zui常見的有弓體、風疹病毒、單純皰疹病毒、沙眼衣原體、及巨細胞,對這幾種病原體的檢測根據其英文詞首簡稱為Torsch試驗。
 
(一)、弓形體的PCR檢測,弓形體有廣泛的自然疫原性,人體多為隱性感染,抵抗力低時可以有臨床表現(xiàn)。弓形體的診斷較困難,血清學方法敏感性較高但有交叉性出現(xiàn)假陽性而且無法確定近期感染、遠期感染或一過性感染。確診的方法是活組織檢查或動物接各,這些方法陽性率太低不能推廣。PCR檢測可以檢出樣本中1-2個病原體而且準確性高,是目前對弓形體檢測zui的方法。作為優(yōu)生優(yōu)育檢查應于妊娠前或妊娠早期取全血樣本,可以用EDTA或肝素抗凝,以EDTA抗凝效果,檢測外周血白細胞中是否有TOX存在。對于不孕,多次自然流產或養(yǎng)小動物的產期婦女,作弓形蟲檢測有更重要的臨床意義。 

(二)、單純皰診病毒,單純皰疹病毒(herpes simplex virus,HSV)是一種DNA病毒,可引起多器官的炎癥,可通過性接觸傳播。HSVⅡ感染復發(fā)率高,80%的感染者于12個月內復發(fā)。HSV感染后經機體免疫系統(tǒng)清除,少數(shù)病人終生攜帶,體弱時復發(fā)。PCR法檢測HSV敏感性高而且可以直接對HSVⅠ/Ⅱ型進行分型鑒定。

(三)、風疹病毒感染:風疹病毒(RV)是一種單股正極性RNA病毒,人是風診病毒的*宿主。RV感染可以引起胎兒的畸形,影響胎兒免疫系統(tǒng)的發(fā)育,因此RV檢測在優(yōu)生優(yōu)育工作中顯得非常重要。RV檢測可以用直接培養(yǎng)法及IgM抗體測試法。培養(yǎng)法費時很長而且常受到其它病毒的干擾,IgM測定法結果了不太準確,PCR法敏感性及特異性都很高而且簡便快速,是RV感染zui的測試方法之一。風疹病毒侵入體內后在上呼吸道增殖而出現(xiàn)癥狀,面部出現(xiàn)丘疹,迅速遍及全身。樣本采用妊娠母親的咽部拭子、血清、產婦的絨毛或妊娠如羊水等。RV病毒是RNA病毒,PCR擴增較復雜,應注意樣本的采集時機,操作的準確性。

(四)、人巨細胞(HCMV),HCMV感染十分普遍,除少數(shù)原發(fā)性感染發(fā)生原發(fā)性單核細胞增多癥外,很大多數(shù)為隱性感染。HCMV可以長期潛伏在體內,當機體免疫功能低下時,病毒會激活而造成嚴重疾病在妊娠期如果孕婦感染HCMV可以引起早產、畸型、死胎及新生兒巨細胞包涵體病等。HCMV屬皰疹病毒科,可以從唾液、尿、宮頸分泌物及乳汁排出。HCMV“金標準”的診斷試驗是用單層成纖維細胞作病毒培養(yǎng),其它的實驗檢查有血清學的檢測及包涵體檢測。PCR是HCMV檢測的一種新方法,用于檢測的樣本有血,生殖道分泌物拭子等,用于優(yōu)生優(yōu)育檢測時應取血樣本。對于早期妊娠病人若有HCMV感染應再檢測羊水,或其它妊娠物,對病人認真及進跟蹤檢查,綜合判斷并采取相應的醫(yī)療措施。 

(五)、沙眼衣原體,沙眼衣原體(CT)不僅能引起沙眼而且能引起生死器感染,是一種性傳播性疾病。與淋病(NG),梅毒等經典性傳播性疾病不同,CT易經其它接觸途徑傳播,少數(shù)地區(qū)對妊娠期婦女普查結果表明此人群中發(fā)病率高達20%-30%。在歐美等國家CT的感染已超過淋病而居性傳播性疾病。衣原體感染常呈無癥性或非特異性癥狀的隱性感染,不容易診斷。以往用培養(yǎng)法進行確診,費時且敏感性、準確性都不足。PCR用于CT檢測時應注意不同檢測目的的取材不同,對于性傳播性疾病診斷應取生殖道分泌物(查脫落細胞),而對于早期妊娠病人應查其全血樣本,在妊娠后期或臨產時再查陰道分泌物以便指導生育時產道清理。 
 

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